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  Optimized ratiometric calcium sensors for functional in vivo imaging of neurons and T lymphocytes.

Thestrup, T., Litzlbauer, J., Bartholomaeus, I., Mues, M., Russo, L., Dana, H., et al. (2014). Optimized ratiometric calcium sensors for functional in vivo imaging of neurons and T lymphocytes. Nature Methods, 11(2), 175-182. doi: 10.1038/NMETH.2773.

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Genre: Zeitschriftenartikel

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1949933.pdf (Verlagsversion), 2MB
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Externe Referenzen

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Urheber

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 Urheber:
Thestrup, T., Autor
Litzlbauer, J., Autor
Bartholomaeus, I., Autor
Mues, M., Autor
Russo, L.1, Autor           
Dana, H., Autor
Kovalchuk, Y., Autor
Liang, Y. J., Autor
Kalamakis, G., Autor
Laukat, Y., Autor
Becker, S.1, Autor           
Witte, G., Autor
Geiger, A., Autor
Allen, T., Autor
Rome, L. C., Autor
Chen, T. W., Autor
Kim, D. S., Autor
Garaschuk, O., Autor
Griesinger, C.1, Autor                 
Griesbeck, O., Autor
Affiliations:
1Department of NMR Based Structural Biology, MPI for biophysical chemistry, Max Planck Society, ou_578567              

Inhalt

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Schlagwörter: -
 Zusammenfassung: The quality of genetically encoded calcium indicators (GECIs) has improved dramatically in recent years, but high-performing ratiometric indicators are still rare. Here we describe a series of fluorescence resonance energy transfer (FRET)-based calcium biosensors with a reduced number of calcium binding sites per sensor. These 'Twitch' sensors are based on the C-terminal domain of Opsanus troponin C. Their FRET responses were optimized by a large-scale functional screen in bacterial colonies, refined by a secondary screen in rat hippocampal neuron cultures. We tested the in vivo performance of the most sensitive variants in the brain and lymph nodes of mice. The sensitivity of the Twitch sensors matched that of synthetic calcium dyes and allowed visualization of tonic action potential firing in neurons and high resolution functional tracking of T lymphocytes. Given their ratiometric readout, their brightness, large dynamic range and linear response properties, Twitch sensors represent versatile tools for neuroscience and immunology.

Details

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Sprache(n): eng - English
 Datum: 2014-01-052014-02
 Publikationsstatus: Erschienen
 Seiten: -
 Ort, Verlag, Ausgabe: -
 Inhaltsverzeichnis: -
 Art der Begutachtung: Expertenbegutachtung
 Identifikatoren: DOI: 10.1038/NMETH.2773
 Art des Abschluß: -

Veranstaltung

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Entscheidung

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Projektinformation

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Quelle 1

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Titel: Nature Methods
Genre der Quelle: Zeitschrift
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Ort, Verlag, Ausgabe: -
Seiten: - Band / Heft: 11 (2) Artikelnummer: - Start- / Endseite: 175 - 182 Identifikator: -