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Sprache(n):
deu - German
Datum:
2003-04-11
Publikationsstatus:
Angenommen
Seiten:
130 S.
Ort, Verlag, Ausgabe:
Berlin : Freie Universität
Inhaltsverzeichnis:
0. Titel 0
1. Zusammenfassung 1
2. Einleitung 2
2.1. Expressionsanalysen 2
2.2. Die Technologie der cDNS-Mikroarrays 7
2.3. Anwendungsmöglichkeiten der Mikroarray-Technologie 17
2.4. Aufbau, Funktion und Erkrankung der menschlichen Netzhaut 19
2.5. Fragestellung 24
3. Material 25
3.1. Biologisches Material 25
3.2. Enzyme 29
3.3. Kits 29
3.4. Längenstandards, Vektor und Primer 30
3.5. Fein- und Biochemikalien 31
3.6. Lösungen und Puffer 33
3.7. Verbrauchsmaterialien 36
3.8. EDV-Programme 37
3.9. Geräte 37
3.5. Fein- und Biochemikalien 31
4. Methoden 38
4.1. Herstellung von cDNS-Mikroarrays 38
4.2. Herstellung der Targets 41
4.3. Hybridisierung und Waschen 51
4.4. Bildgewinnung und Datenanalyse 53
4.5. Clusteranalyse 54
5. Ergebnisse 55
5.1. Optimierung wesentlicher Schritte der cDNS-Mikroarray Technologie 55
5.2. Vergleich von Nylon-Arrays mit Glas-Mikroarrays 62
5.3. Charakterisierung von Subtraktionsbanken durch cDNS-Mikroarrays 65
5.4. Optimierung für Expressionsanalysen mit limitiertem Augenmaterial 70
5.5. Genexpressionsstudie in der ND-Knockout Maus 77
6. Diskussion 85
6.1. Optimierung wesentlicher Schritte der cDNS-Mikroarray Technologie 85
6.2. Vergleich von cDNS-Mikroarrays mit Nylonfilter-Arrays als Screeningmethode 87
6.3. Differenzielles Screening der Subtraktionsbank 88
6.4. Optimierung für Expressionsanalysen mit limitiertem Augenmaterial 89
6.5. Komplexität und Anreicherung der Targets 91
6.6. Analyse der Genexpression in der ND-Knockout Maus 92
6.7. Ausblick 98
7. Literaturverzeichnis 100
8. Abkürzungsverzeichnis 112
9. Abbildungsverzeichnis 115
10. Tabellenverzeichnis 116
11. Anhang 117
11.1. Haushaltsgene 117
11.2. Retina-spezifische und Apoptose-relevante Gene 119
11.3. Pools für das Redundanz-Screening und Anzahl detektierter Gene 120
11.4. Hybridisierung vollständiger cDNS und Anzahl detektierter Gene 121
11.5. Klone, die bestätigt differenziell exprimierte Gene repräsentieren 121
11.6. Expressionsmuster der RNS-Targets im Zeitverlauf 122
11.7. Expressionsmuster der SMART-Targets im Zeitverlauf 124
12. Wissenschaftliche Beiträge 128
13.1. Kongressbeiträge 128
13.2. Publikationen 129
13.3. Array-Kurse 129
13. Danksagung 130
Art der Begutachtung:
-
Identifikatoren:
eDoc: 194824
Art des Abschluß:
Doktorarbeit